• MIP1a活性蛋白對THP1細胞的趨化作用

    巨噬細胞炎性蛋白1α(Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha, MIP1a),又名趨化因子配體3(CCL3),屬于趨化因子家族。MIP1a參與巨噬細胞、單核細胞和中性粒細胞的聚集及激活。實驗目的:評估MIP1a活性蛋白對單核細胞系THP1的趨化作用。實驗方案:1.將THP1細胞培養在0.5% FBS的RPMI 1640培養基中;2.用無血清的RPMI 1640培養基將MIP1a活性蛋白稀釋至100ng/mL;3.將100ng/mL的MIP1a活性蛋白加入THP1細胞中;4.在37℃,5%CO2條件下培養5小時;5.在不同的顯微鏡視野下觀察并計數細胞遷移的數量。實驗結果:A.加入100ng/mL的MIP1a活......

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  • NGF活性蛋白誘導PC12細胞分化及其結合活性的驗證

    NGF活性蛋白誘導PC12細胞分化實驗實驗原理:神經生產因子(Nerve growth factor, NGF)是一種神經營養因子和神經肽,主要參與某些神經元的生長發育、維持、再生長和分化作用。PC12細胞株來源于一種可移植的鼠嗜鉻細胞瘤,該細胞對NGF有可逆的神經元顯形反應,當PC12細胞暴露在NGF,細胞會在一周之內作出反應,主要是停止細胞分裂并延伸神經突。實驗方案:PC12細胞培養在含5%胎牛血清和10%馬血清的Ham's F12K培養基中,當細胞到達對數生長期時,換用含有10ng/ml NGF重組蛋白的新鮮培養基,在倒置顯微鏡下每天觀察細胞的形態。實......

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  • IL4活性蛋白誘導THP1細胞的分化實驗

    白細胞介素4(IL4)是II型輔助T細胞(Th2細胞)分泌的一種細胞因子。它有很多的生物學作用,包括:刺激活化B細胞和T細胞增殖;對于B細胞、T細胞、肥大細胞、巨噬細胞和造血細胞均有免疫調節作用。實驗原理:體外培養狀態下,外源性的IL4可誘導THP1細胞分化為樹突狀細胞和巨噬細胞。實驗過程:將THP1細胞置于RPMI-1640培養基中,以2ng/mL IL4進行刺激。7天后,觀察細胞的形態變化。實驗結果:7天后,對比細胞的形態變化,如下:A.以IL4刺激后THP1細胞B.未刺激的THP1細胞實驗結果:通過觀察細胞的形態變化,可以發現用IL4刺激7天后的T......

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  • IL10活性蛋白可抑制LPS刺激的THP1細胞產生IL1β

    白介素10(IL10),又被稱為細胞因子合成抑制因子(CSIF),是一種抗炎因子。IL10是一種多細胞源、多功能的細胞因子 ,調節細胞的生長與分化,參與炎性反應和免疫反應,是公認的炎癥與免疫抑制因子。據報道,IL10可以抑制細胞因子的分泌,抑制單核巨噬細胞的抗原提呈作用。實驗原理:IL10主要抑制脂多糖(LPS)介導的由巨噬細胞和Th1細胞產生的促炎細胞因子TNFα、IL1β、IL12和IFNγ的分泌。為驗證IL10活性蛋白的活性,本實驗通過LPS刺激THP1細胞產生IL1β,通過對比IL10對IL1β分泌的抑制作用,以評價IL10活性蛋白的活力。實驗過程:將......

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  • 血管緊張素轉化酶2(ACE2)活性蛋白

    云克隆推出了三大物種科研用血管緊張素轉化酶2(ACE2)活性蛋白產品,以期為助力科研盡綿薄之力。云克隆ACE2相關活性蛋白產品CatalogSpeciesProductAPB886Hu01HumanActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APB886Mu01MouseActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APB886Ra01RatActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APX273Ge02Pan-speciesActive Spike Protein (SP)以人血管緊張素轉化酶2,ACE2(APB886Hu01)活性蛋白為例,活性驗證方案如下:實驗原理:SARS-CoV和SARS-CoV-2的spike蛋白(SP)可通過......

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  • 什么是中和抗體,該怎么檢測?

    最近,在新冠疫情中想必大家總是聽到一個專有名詞——中和抗體,它是什么呢?和普通抗體有什么區別呢?在病毒學中,中和抗體(Nautralizing Antibody, )首先是抗體,它在抗體這個層面上和普通抗體的概念重合,是機體免疫細胞被抗原激活后,由B淋巴細胞分化的漿細胞分泌的,能與相應抗原特異性結合的免疫球蛋白。除此之外,中和抗體顯然還應該有專門針對“中和”的更進一層的含義,這里的中和是指該抗體能和病毒結合,進而阻斷病毒感染。這種阻斷能力主要通過三種方式來實現:1.阻斷病毒與細胞表面受體的結合;2.阻斷病毒侵入細胞;3.阻......

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  • 活性蛋白——IFN-γ的細胞刺激實驗

    干擾素γ(IFN-gama)是一種多功能蛋白,IFN-γ由T淋巴細胞和NK細胞產生,它既是一種高效的抗病毒生物活性物質,又是一種具有廣泛免疫調節作用的淋巴因子。IFN-γ還能活化中性粒細胞、NK細胞,刺激血管內皮細胞和白細胞合成的黏附分子,促進Th1細胞發育并抑制Th2細胞活化與增殖。實驗方案:據報道,IFNγ是人單核THP1細胞的重要激活因子。因此,我們選用THP-1細胞作為待刺激細胞,用不同濃度的IFNγ與THP1細胞在RPMI-1640培養基中共培養5天,在顯微鏡下每天觀察THP-1細胞的形態。實驗結果:A.THP1細胞在RPMI-1640培養基中以5ng/ml IFN-γ......

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  • 肽酰甘氨酸α-酰胺化單加氧酶活性實驗

    肽酰甘氨酸α-酰胺化單加氧酶(Peptidyl-glycine alpha-amidating monooxygenase, PAM)是多種多肽產生生物活性所必需的酶。它含有兩個具有催化活性的酶活性域:肽基甘氨酸α-羥基化單加氧酶(PHM)和肽基-α-羥基甘氨酸α-酰胺化裂解酶(PAL)。這些催化結構域依次作用于將神經內分泌肽催化為活性的α-酰胺化產物。通常,將Dns-Tyr-Val-Gly底物水解為Dns-Tyr-Val-NH2作為PAM的典型活性測定法。實驗方法:1.在1mL含100mM MES / KOH(pH 6.0)、30mM KI,30mM KCl,1μmol/ L硫酸銅,100ug / mL過氧化氫酶,1%(v / v)乙醇,0.001%(v /......

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