云克隆可提供轉基因鼠繁殖以及乳鼠相關實驗服務

云克隆不僅可以開展正常周齡大、小鼠的相關實驗,還可進行以胎鼠、乳鼠、新生鼠為實驗對象的相關實驗,以及轉基因小鼠和基因敲除小鼠的繁殖,種群擴大工作。

 

案例展示:

 

I. 先天性巨結腸相關性小腸結腸炎的動物模型

先天性巨結腸相關性小腸結腸炎(HAEC)是先天性巨結腸的常見并發癥,是導致巨結腸患兒死亡的常見原因,發病率為5%~42%。

為了建立先天性巨結腸相關性小腸結腸炎的動物模型, 由于采用了Ednrb-/-的基因敲除的鼠,雜合子和野生型鼠均為灰色,純合子就表現棕白色相間的花斑鼠(如圖1所示)。Ednrb-/-純合子小鼠由于末端結腸缺乏腸神經節細胞分布,在出生后出現嚴重的便秘及反復發作的HAEC,如不進行干預一般在出生后3-4周死亡,是目前最常用的HSCR及HAEC動物模型之一。

 

圖1.繁殖的 Ednrb-/-純合子小鼠(花斑鼠)與雜合子小鼠對比圖

 

云克隆動物中心進行了Ednrb-/-轉基因鼠的交配、繁殖和鑒定工作,圖1中的鼠即為我們生產動物房所繁殖的轉基因鼠,并在轉基因鼠上進行了一系列細胞治療先天性巨結腸病的研究。

 

II. 壞死性小腸結腸炎(NEC)大鼠模型

壞死性小腸結腸炎(NEC)是早產兒、低出生體重兒最常見急腹癥之一。該病的起病癥狀不典型,病情進展快,死亡率高。目前國內的NEC病死率約為10%~50%。因此,建立該疾病的動物模型很有必要。

云克隆采用體重約5~10g的新生SD大鼠,在其出生48h內母乳喂養,自由攝食,與母鼠同籠;出生后48h隨機分成模型組和對照組。對照組新生大鼠出生48h后繼續與母鼠同籠,鼠乳喂養,不進行缺氧冷刺激。模型組新生大鼠出生48h后與母鼠分開,置入保育箱中并采用鼠乳代用品人工喂養,并定期給與缺氧冷刺激,以建立新生鼠壞死性小腸結腸炎動物模型;具體建模方法如下:

1. 新生大鼠與母鼠分離,放置在保育箱內(控制保育箱內溫度28~30℃,濕度45%~65%),采用鼠乳代用品喂養。采用5號靜脈留置針定時經口插管喂養,第1天給予0.2ml/次,每4小時1次,隨后每24h增加0.2ml/次,48h后逐漸增至0.4ml。

2. 缺氧及冷刺激:將新生SD大鼠置入缺氧箱中,5%氧氣+95%氮氣 10分鐘,隨即打開缺氧箱,取出新生鼠,隨后將其置入冰箱冷藏室中,給予4℃刺激,持續10分鐘,結束后放回保育箱。每日2次,分別進行一次缺氧+冷刺激,連續3d,最后一次缺氧+冷刺激后24h空腹斷頭處死大鼠,打開腹腔取出十二指腸下端至直腸上端的腸道組織。結果發現,與對照組新生大鼠相比,NEC組新生大鼠明顯體型偏?。ㄈ鐖D2所示):

                                                 


圖2. NEC模型乳鼠及其對照的對比圖

 

III. 新生鼠腦白質損傷

新生兒腦白質損傷是一組具有多種病理類型的疾病,其病理特點主要包括反應性星形膠質化、髓鞘損害和軸突病變等,這些病變被認為是腦癱發生的最重要的危險因素。缺氧缺血或宮內感染等最終導致腦白質組織的壞死、星形膠質化、細胞凋亡以及囊腔形成等多種病理改變。

云克隆建立了新生兒腦白質損傷的大鼠模型,具體方法如下:

將若干SD大鼠按照雌雄比=1:2進行交配合籠,待其生下子代后,將6日齡乳鼠挑出,隨機分成模型組和對照組。模型組操作如下:

1)出生后6天的大鼠在冰上間接冷卻至對傷害性刺激無反應時進行深度麻醉;

2)用酒精清潔皮膚,在前頸部位做腹正中切后,在解剖顯微鏡下,通過輕輕收縮肩胛舌骨和胸鎖乳突肌的肌肉來接近右頸總動脈分叉點;

4)頸動脈鞘周圍筋膜被切除,從附近的走神經和交感神經處用鉤子分離近端內支,將頸內動脈結扎;

5)結扎后,縫合皮膚切口,保持體溫(28℃及以上)直到完全清醒,然后放回大鼠;

6)頸部結扎1小時后,將動物置于充滿氮氣的密封箱(37℃),灌輸6%的氧氣,缺氧缺血感染組在缺氧環境中暴露80 min;

7)缺氧缺血感染組動物放在電熱墊子上恢復30分鐘后,腹腔注射 (0.3 mg/kg) 的脂多糖;

8)以頸動脈暴露,但是沒有結扎、無缺氧暴露、無LPS注射的大鼠為對照組。

 

武漢云克隆動物有限公司(CCA)為云克隆科技股份有限公司(CCC)的全資子公司,其位于振華路33號的SPF繁殖動物房面積220平方米,具有《實驗動物生產許可證》。

 

 

具有動物繁殖資質的屏障環境的動物房,為云克隆進行種群擴大,實驗動物的繁殖,孕鼠和孕鼠的相關的實驗研究及服務提供了有利的保障。


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