小鼠焦慮模型的建立

小鼠焦慮模型成功建立的一個重要方面就是讓小鼠產生焦慮心理,那如何讓小鼠產生焦慮心理呢?云克隆公司采用了高架十字迷宮系統(elevated plus-maze test,EPM)。高架十字迷宮具有一對開臂和一對閉臂,嚙齒類動物由于嗜暗性會傾向于在閉臂中活動,但出于好奇心和探究性又會在開臂中活動。該系統利用動物對新異環境的探究特性和對高懸敞開臂的恐懼形成矛盾沖突行為來考察動物的焦慮狀態。高架十字迷宮被廣泛應用于焦慮研究。

那又該如何判斷焦慮模型是否建立成功呢?研究發現,當機體內缺乏gABA時,會產生焦慮、不安、疲倦、憂慮等情緒。谷氨酸(Glu)是中樞神經系統內含量最高,作用最廣泛的興奮性氨基酸,涉及腦內的很多重要生理功能。因此,腦中gABA和Glu的表達情況可作為判斷的標準之一。

1. 實驗動物:SPF級健康ICR小鼠,雄性,8周,體重(25±2)g。

2. 實驗主要儀器: 高架十字迷宮系統。

3. 實驗分組

    A組:空白組,10只。B組:給藥組,10只,地西泮,按2mg/kg/天。

4. 主要試劑

γ-氨基丁酸(gABA)檢測試劑盒:Cloud-Clone Corp. 貨號CEA900Ge    

    谷氨酸(Glu)檢測試劑盒:Cloud-Clone Corp. 貨號CES122Ge  

地西泮片 

    5. 建模方法

    給藥組灌胃給予相應劑量的地西泮片,空白組給予相同體積蒸餾水,每天上午、下午各一次,連續灌胃7 d,每次灌胃量根據分組按照50ul/10g體重。第8天上午繼續灌胃給藥一次,灌胃40min后進行高架十字迷宮檢測,于末次給藥前8 h禁食。將小鼠從中央格面向閉合臂放入迷宮,記錄5 min內小鼠的活動情況。

   6. 模型的評價

   6.1動物行為學觀察:進入開放臂次數、開放臂停留時間、進入閉合臂次數、閉合臂停留時間。進入開放臂次數及停留時間與大鼠的焦慮情緒成負相關,進入開放臂次數越少,停留時間越短,說明老鼠的焦慮情緒越嚴重。

   6.2 檢測腦中gABA和Glu的表達:給藥組gABA和Glu含量均高于空白組。

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